循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)是指在癌癥患者血液中循環(huán)的腫瘤特異性DNA片段,通常來(lái)源于腫瘤細(xì)胞的凋亡或壞死。由于ctDNA攜帶了腫瘤的基因突變信息,其檢測(cè)在癌癥的早期診斷、治療監(jiān)測(cè)和預(yù)后評(píng)估中具有重要意義。
ctDNA提取試劑盒是實(shí)現(xiàn)這一目標(biāo)的關(guān)鍵工具,本文將全面解析其工作原理及優(yōu)勢(shì)。
工作原理
ctDNA提取試劑盒通常基于磁珠分離技術(shù)或柱層析技術(shù),以下是這兩種技術(shù)的基本工作原理:
磁珠分離技術(shù):
樣本預(yù)處理:首先,將患者的血液樣本進(jìn)行預(yù)處理,包括離心分離血漿或血清,去除細(xì)胞和其他雜質(zhì)。
裂解和結(jié)合:將預(yù)處理后的血漿或血清與含有磁性顆粒的裂解緩沖液混合,使細(xì)胞膜和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)破裂,釋放出DNA。
洗滌和純化:通過(guò)磁場(chǎng)將磁性顆粒連同結(jié)合在其上的DNA分離出來(lái),然后用洗滌緩沖液去除殘留的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì)。
洗脫:較后,用洗脫緩沖液將磁性顆粒上的DNA釋放出來(lái),得到高純度的ctDNA。
柱層析技術(shù):
樣本預(yù)處理:同樣,首先對(duì)血液樣本進(jìn)行預(yù)處理,分離出血漿或血清。
裂解和結(jié)合:將預(yù)處理后的血漿或血清通過(guò)層析柱,柱上的特定配體會(huì)與DNA結(jié)合,而其他雜質(zhì)則不會(huì)。
洗滌和純化:通過(guò)洗滌步驟去除未結(jié)合的雜質(zhì)。
洗脫:較后,用洗脫緩沖液將結(jié)合在柱上的DNA釋放出來(lái),得到高純度的ctDNA。
優(yōu)勢(shì)
高靈敏度:試劑盒能夠從極少量的血液樣本中提取到微量的ctDNA,這對(duì)于早期癌癥檢測(cè)尤為重要。
高特異性:通過(guò)優(yōu)化試劑盒的裂解和純化步驟,可以有效去除背景噪音,提高ctDNA的特異性。
操作簡(jiǎn)便:試劑盒通常具有簡(jiǎn)化的工作流程,減少了操作步驟和時(shí)間,提高了實(shí)驗(yàn)效率。
適用范圍廣:ctDNA提取試劑盒適用于多種類型的癌癥檢測(cè),包括肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌等。
非侵入性:與傳統(tǒng)的組織活檢相比,血液樣本的采集更為簡(jiǎn)單和非侵入性,減少了患者的痛苦和風(fēng)險(xiǎn)。
實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè):由于血液中的ctDNA水平可以實(shí)時(shí)反映腫瘤的變化,因此試劑盒可用于動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)治療效果和疾病進(jìn)展。
ctDNA提取試劑盒在癌癥檢測(cè)和監(jiān)測(cè)中具有重要價(jià)值,其高靈敏度和高特異性使其成為液體活檢領(lǐng)域的關(guān)鍵技術(shù)之一。隨著技術(shù)的不斷進(jìn)步,ctDNA提取試劑盒將在未來(lái)發(fā)揮更大的作用,為癌癥的早期診斷和個(gè)性化治療提供有力支持。