ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。
在進(jìn)行ELISA試劑盒試驗時,有人會問發(fā)現(xiàn),ELISA試劑盒吸光度值衰減,為了能更好地處理這一問題,我們得現(xiàn)了解什么是Elisa試劑盒吸光度值衰減,就是指加完顯色液(購買)顯色一定時間后,再加終止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減.二次均小于一次.并且,加終止液時,從一條加到12條后,測試發(fā)現(xiàn),吸光度值從1-12條逐級衰減.前提是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,并且包被相同蛋白.出現(xiàn)衰減我們該怎么辦呢,我們下面來仔細(xì)說說。
① 顯色時間調(diào)整,如果你現(xiàn)在的顯色時間是10MIN,那調(diào)整到30MIN,再加終止液,觀察上述現(xiàn)象是否出現(xiàn).
?、?終止液中加入少量甘油看下怎么樣.建議您使用BIM品牌的ELISA試劑盒,顯色時間是30分鐘,終止后要求在30分鐘內(nèi)檢測,加入終止液后,建議在加入終止液后2到3分終內(nèi)檢測,這是OD值相對比較高.擬合值能達(dá)到四個9.
以上就是ELISA試劑盒吸光度值衰減的處理方法,希望能幫助大家更好地使用ELISA試劑盒。